ALSTEM逆轉錄病毒濃縮沉淀手冊

ALSTEM是一家位于灣區的早期生物技術公司，擁有快速擴展的產品和服務組合，為生物制藥和學術機構提供服務。受到加利福尼亞干細胞研究承諾的啟發，ALSTEM于2012年由具有iPS細胞重編程和基因組編輯技術專業知識的科學家創立。

Retrovirus Precipitation Solution: #VC200

逆轉錄病毒沉淀解決方案：＃VC200

描述

逆轉錄病毒沉淀溶液是為逆轉錄病毒顆粒沉淀而優化的聚合物混合物。它為濃縮逆轉錄病毒顆粒提供了一種簡單，快速和的方法。在這個簡單的方案中，您只需將逆轉錄病毒上清液與逆轉錄病毒沉淀溶液混合，孵育一小段時間，然后在標準離心機中旋轉混合物。您可以將您的逆轉錄病毒滴度提高至4倍，并且無需超速離心即可獲得的回收率。逆轉錄病毒沉淀解決方案是一種5x解決方案。

特征

• 易于使用：簡單混合
• 不需要超速離心
• 輕松擴展大容量
• 濃度增加高達100倍
• 經濟有效的旋轉方案，有效的病毒濃度
• 無毒：對包括ES細胞在內的所有細胞系都是安全的

• 概觀

逆轉錄病毒沉淀溶液是優化用于逆轉錄病毒顆粒沉淀的聚合物混合物。它為濃縮逆轉錄病毒顆粒提供了一種簡單，快速和的方法。在簡單的方案中，您只需將逆轉錄病毒上清液與逆轉錄病毒沉淀溶液混合，孵育一小段時間，然后在標準離心機中旋轉混合物。您可以將您的逆轉錄病毒滴度提高至4倍，并且無需超速離心即可獲得的回收率。逆轉錄病毒沉淀解決方案是一種5x解決方案。

逆轉錄病毒濃縮沉淀手冊

• 程序

1.將含有逆轉錄病毒顆粒的培養基從平板轉移到無菌容器中，并以300×g離心培養基10分鐘以除去細胞碎片。

2.通過0.45μm過濾器過濾上清液。

3.將過濾的上清液轉移到無菌容器中，并向每4體積含逆轉錄病毒的上清液中加入1體積的冷逆轉錄病毒沉淀溶液（4℃）。（實施例：5ml逆轉錄病毒沉淀溶液，含20ml病毒上清液）。

4.充分混合并冷藏3小時至過夜。與逆轉錄病毒沉淀溶液混合的含逆轉錄病毒的上清液在4°C下可穩定長達4天。

5.在4℃下以1500×g離心混合物30分鐘。離心后，逆轉錄病毒顆?？稍谌萜鞯撞匡@示為米色或白色顆粒。

6.丟棄上清液。通過以1500×g離心5分鐘來旋轉殘留溶液。通過抽吸去除所有液體痕跡，小心不要打擾顆粒中沉淀的逆轉錄病毒顆粒。

7.使用冷的無菌PBS或DMEM在4℃下以1/10至1/100的原始體積重懸逆轉錄病毒顆粒。

8.在低溫小瓶中分裝并儲存在-80°C直至準備使用。

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