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    laebio K007說明書

    更新時間:2019-02-22      點擊次數:2445

     

    laebio專注于新的親和純化蛋白和參與檢測體外 Sumoylation活性的高度特異性抗體 。我們可以為您提供全套的SUMO化蛋白,包括SAEI / SAEII,UBC9,SUMO-1,SUMO-3,立即開始您的SUMO化檢測。   為了篩選針對拓撲異構酶的抗腫瘤藥物,我們提供人類DNA拓撲異構酶I,II ,和II b,和他們的抗體。這些試劑包括TOPO I,TOPO II a,TOPO II b,TOPO I抗體F14,TOPO I抗體T8N,TOPO I檢測試劑盒,TOPO  我藥物篩選試劑盒,TOPO II 抗體,和TOPO II b 抗體。我們還提供蛋白激酶A,DARPP-32,磷酸化DARPP-32,磷酸酶抑制劑-1,磷酸酶抑制劑-1,磷酸酶抑制劑-2,磷酸酶抑制劑-2抗體的催化亞基,為您研究多巴胺能功能。腦。

    laebio K007說明書

    Sumoylation Control Kits 
    Catalog # K007 supplied with proteins

    Catalog#K007提供蛋白質

     

    描述:
    該檢測試劑盒含有用于常規檢測SUMO化活性的試劑。包括Sumoylation標記(人拓撲異構酶I蛋白)以允許清楚地檢測反應。已經證明該測定法適用于粗提物。強烈建議將人類EI,活性物質(Cat#P001; P006),人類E II,活性物質(Cat#P002; P011)和人類SUMO I,活性物質(Cat#P003; P012)與此試劑盒一起使用。

    K007套件包含:

    • SAE I和SAE II(人類EI)(Cat#P006)
    • UBC9(人類E II)(Cat#P011)
    • SUMO I(活動形式)。(Cat#P012)
    • 人DNA拓撲異構酶I片段。(Cat#B007)
    • 抗拓撲異構酶I抗體。(Cat#AP006)(凍干的抗體應在使用前用100ul H 2 O 重構。)
    • 10X的SUMO化反應緩沖液。(Cat#B006)(10x緩沖液含有200mM Hepes pH 7.5,50mM MgCl 2和20mM ATP。)

    上述試劑適用于50次SUMO化反應。

     

    測定條件:
    SUMO化測定在20微升的終體積中含有20mM的Hepes pH為7.5,5mM的氯化鎂反應緩沖液中進行2,2mM的ATP。我們建議添加新鮮的2mM ATP以確保提供足夠的能量。

    拓撲異構酶I Sumoylation Control Protocol:

    1. 加入2ul 50kd拓撲異構酶I片段(Cat#B007)作為每個反應的底物。
    2. 在每個反應中,首先向底物中加入2ul E2,然后加入2ul Sumo-1,2ul 10x反應緩沖液(Cat#B006),2ul E1和2μl20mMATP。后,加入H 2 O使總體積達到20μl 。
    3. LAE SUMO化蛋白的反應濃度如下:
      • EI:7.5ug / ml
      • E II:50ug / ml
      • SUMO-1:50ug / ml
            為對照測定的推薦條件是37 ø 30?60分鐘c。。
       
    4. 在10 ml(Cat#AP006)中使用1000倍稀釋的提供的拓撲異構酶I抗體進行免疫印跡。應檢測四個主要的sumoylated波段。

    使用Topo-1抗體(cat#AP006)的SUMO化 50Kd Topo-1蛋白(cat#B007)的Western印跡(12.5%凝膠)。泳道1:sumoylated 50Kd Topo-I片段; 泳道2:未經過?;?0Kd Topo-I片段。

    Topo-1抗體( Cat#AP006)可檢測至少四個主要的SUMO化Topo-1片段 。

     

    Sumoylation Protocol:

    1. 準備合適的純化底物蛋白。
    2. 在每個反應中,首先向底物中加入2μlE2,然后加入2μlSy,2μl10μl反應緩沖液,2μlE1和2μl20mMATP。后,加入H 2 O使終體積達到20μl。
    3. LAE蛋白的反應濃度如下:
      • EI:7.5ug / ml
      • E II:50ug / ml
      • SUMO-1:50ug / ml

     

    運輸/儲存:
    此套件隨附干冰,應儲存在-70 o C或更低溫度。  

    法律考慮:僅供研究使用。

     

     

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