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    genetargetsolutions電動大腸桿菌

    更新時間:2019-12-27      點擊次數:2280

    genetargetsolutions電動大腸桿菌

    TransforMax™EPI300™電動大腸桿菌

    應用領域

    • 使用CopyControl™克隆系統生成可誘導的拷貝數克隆。
    TransforMax™EPI300™  大腸桿菌  細胞缺少  tonA  基因,經過改造可與Epicentre的CopyControl™cDNA,基因和PCR克隆試劑盒以及其他不需要噬菌體T1抗性細胞的CopyControl克隆系統一起使用。細胞包含可誘導的突變體  trfA  基因,其基因產物是從ori V 復制起點開始復制所必需的  ,例如在CopyControl pCC1™載體中。在LB氯霉素平板上或在補充氯霉素的LB或SOC培養基中,在TransforMax EPI300 大腸桿菌中生長的CopyControl克隆   從F因子復制子以單拷貝數復制,因為trfA的表達  基因被抑制。加入CopyControl誘導溶液可誘導細胞表達  trfA  基因產物,并誘導其從ori V 以高拷貝數復制  (圖1)。從ori V 復制可  產生更高的產量和更高的克隆DNA純度。好處

     

    • 克隆的拷貝數受到與trfA  基因連接的誘導型啟動子的嚴格控制  。
    • 具有各種大小的克隆的高轉化效率。
    • lacZΔM15  用于重組體的藍/白篩選。
    • 限制-負[ mcrA,Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)]表型能夠有效克隆甲基化DNA。
    • 核酸內切酶負號(endA1),以確保高產量的DNA。
    • 重組減號(recA1),用于較大插入片段克隆的更高穩定性。
     
     

    基因型

    F- mcrAΔ(mrr-hsdRMS-mcrBC)Φ80dlacZΔM15ΔlacX74recA1 endA1 araD139Δ(ara,leu)7697 galU galKλ-rpsL(StrR)nupG trfA dhfr

    TransforMax EPI300電  感受態大腸桿菌

    • pUC19的轉化效率> 1 x 1010 cfu / µg。

    TransforMax EPI300具有化學活性的  大腸桿菌

    • pUC19的轉化效率> 5 x 108 cfu / µg。

     

    圖1.在TransforMax™EPI300™ 大腸桿菌中, 可以將CopyControl™BAC克隆的拷貝數誘導10到20倍  加入CopyControl誘導溶液后,來自CopyControl BAC克隆的110-145 kb BAC DNA的產量增加了14倍以上。U =未誘導的細胞;I =誘導的細胞。

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    貨號 濃度 尺寸

    TransforMax™EPI300™電動大腸桿菌

      
    EC30011010 X 100微升
    EC30015050 X 100微升

    包括CopyControl™誘導溶液和pUC19對照DNA。

    TransforMax™EPI300™具有化學活性的大腸桿菌

    C300C10510 X 50微升

    包括CopyControl™誘導溶液和pUC19對照DNA。

    CopyControl™感應解決方案

    CCIS12525毫升

    1,000X濃縮溶液。過濾器已消毒。

     

     

     

     

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