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genaxxon M3009.0250說明書
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SNP Pol DNA 聚合酶，用于簡單、可靠和快速的等位基因特異性鑒別，例如。CRISPR / Cas9 點突變，用于檢測不正確的 CRISPR / Cas9 產品，或驗證測序結果。SNP Pol DNA 聚合酶具有高度特異性，無論是否存在引物-模板-復合物的錯配。錯配（點突變）必須位于引物的 3' 端。因此，突變等位基因可以與野生型等位基因準確區分開來——無需測序，因為聚合酶在錯配的情況下根本不會擴增。
只需將您的引物放在假定的點突變上（重要：點突變必須在 3' 末端），聚合酶將以幾乎 100% 的準確度檢測該區域的錯配：如果模板堿基與 3' 末端互補引物顯示突變，而引物沒有，不會發生擴增 - 短時間內 100% 確定！
因此，SNP Pol DNA 聚合酶可以輕松、省時且經濟高效地用于點突變的篩選。
變體SNP PolTaq DNA 聚合酶 >具有 5'-3' 核酸酶活性，因此可用于特定水解探針，例如 Taqman® 探針或分子信標。
以*提供測試樣品！德國境內無運費。測試樣品價格將在產品的第一個正式訂單中退還。
說明
SNP波爾DNA聚合酶>（您好GH狄單核苷酸scrimination) 是一種高度選擇性的 DNA 聚合酶。它專為需要高鑒別率的等位基因特異性鑒別而開發：例如在等位基因特異性 PCR (ASA; AS-PCR)、等位基因特異性引物延伸 (AS-PEX)、SNP 分析、基因分型或甲基化- 特異性 PCR (MSP)。許多其他 DNA 聚合酶耐受錯配的引物-模板復合物，因此不適合。另一方面，SNP Pol DNA 聚合酶專門區分這些（高辨別力）并僅提供具有匹配引物對的 PCR 產物！Genaxxon SNP Pol 和 SNP PolTaq DNA 聚合酶通過兩個等位基因之間的等位基因特異性 PCR 差異高達 100%，并且在簡單的 qPCR 后，給出關于存在哪個等位基因的明確結果。因此，
等位基因特異性 PCR 可用于量化野生型序列庫或背景中的突變率。NGS確定的突變頻率的驗證 也可以通過等位基因特異性 PCR 和 SNP Pol DNA 聚合酶來驗證。SNP PolTaq DNA 聚合酶非常適用于液體活檢 樣品的分析 。使用 SNP PolTaq，可以很好地分析和量化癌癥突變的存在和頻率。
下圖：應用說明 SNP Pol DNA 聚合酶
我們建議設計具有較短擴增子長度（約 60-200 bp）的引物以獲得最佳結果，但更長的擴增子長度也是可能的。如果更長的擴增子 > 500 bp，可能需要添加額外的鎂 (+0.5 - 1.5mM)。
SNP Pol DNA 聚合酶（M3009 >或M3061 >）可與非特異性熒光染料（例如 Genaxxon's Green DNA Dye >或 SybrGreen®）一起用于實時 PCR。當使用特定的 PCR 探針時，只能使用 SNP PolTaq DNA 聚合酶，因為只有它們具有 5'-3' 核酸外切酶活性。
憑借我們的高品質 dNTPs Set (M3015.4100) >或Mix (M3016.1010) >或我們的DNA Ladders >以及我們有利的標準瓊脂糖 (M3044) >我們可以為您的 PCR 提供其他產品。
SNP Pol DNA 和 SNP Pol DNA 聚合酶的應用領域
- 點突變的監測、驗證和檢測
- 識別正確或錯誤的 CRISPR/Cas9 產品
- 測序結果的驗證/驗證
- 突變的量化（例如 NGS 結果）
- SNP 檢測通過等位基因特異性擴增 (ASA) / 等位基因特異性 PCR
- 亞硫酸氫鹽處理的 DNA（CpG 甲基化側）后的甲基化特異性 PCR (MSP)
- HLA 基因分型
- 微測序
- 使用水解探針的實時 PCR
- 實時多重 PCR
- 秀麗隱桿線蟲中的 DamID-seq 數據。
作為 ChIP 的替代方案，最近顯示通過測序鑒定 DNA 腺嘌呤甲基轉移酶 (DamID-seq) 能夠表征單個哺乳動物細胞中的結合位點。此外，DamID 可以通過在組織特異性啟動子下以受控方式表達 Dam 融合蛋白來實現細胞類型特異性分析。在本報告中，我們提出了一個用戶友好的管道來分析秀麗隱桿線蟲中的 DamID-seq 數據。
Sharma R、Ritler D、Meister P.
秀麗隱桿線蟲發育過程中核組織 DNA 腺嘌呤甲基轉移酶鑒定分析的工具。創世紀。2016 年 2 月 4 日。doi：10.1002/dvg.22925。
- 使用 SNPase DNA 聚合酶進行 SNP 基因分型的微量測序可以通過以下描述的程序進行：
Lovmar L、Fredriksson M、Liljedahl U、Sigurdsson S、Syv?nen AC。
通過微型測序和微陣列進行的定量評估揭示了全基因組擴增 DNA 的準確多重 SNP 基因分型。核酸研究。2003;31:e129。
- HiDi DNA 聚合酶的等位基因特異性錯配選擇性
Drum M、Kranaster R、Ewald C、Blasczyk R、Marx A (2014) 在等位基因和甲基化特異性擴增中具有更高選擇性的水生棲熱菌 DNA 聚合酶變體。PLoS 一 9（5）：e96640。doi:10.1371/journal.pone.0096640
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